昨日行业协会传递新研究成果,RNA与cDNA杂交技术在分子生物学研究中的应用与挑战

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RNA与cDNA杂交技术是分子生物学研究中的一种重要技术手段，它利用RNA与互补的cDNA分子之间的碱基互补配对原理，实现基因表达水平的检测和基因序列的克隆。本文将详细介绍RNA与cDNA杂交技术的原理、应用以及面临的挑战。 ### 原理 RNA与cDNA杂交技术基于以下原理：在细胞中，mRNA通过转录过程从DNA模板上合成，然后经过翻译过程生成蛋白质。在这个过程中，cDNA（互补DNA）作为一种稳定的分子，可以代表mRNA在分子水平上进行分析。当RNA与cDNA分子进行杂交时，它们之间会发生碱基互补配对，形成稳定的双链结构。通过检测杂交双链的形成，可以间接反映mRNA的表达水平。 ### 应用 1. **基因表达分析**：RNA与cDNA杂交技术可以用于检测特定基因的表达水平，为研究基因调控机制提供重要依据。例如，通过比较正常细胞与肿瘤细胞中特定基因的mRNA表达水平，有助于发现与肿瘤发生相关的基因。 2. **基因克隆**：利用RNA与cDNA杂交技术，可以从复杂的基因表达谱中分离出目的基因。通过逆转录过程，将mRNA转化为cDNA，然后通过PCR扩增目的基因，从而实现基因克隆。 3. **基因编辑**：RNA与cDNA杂交技术可以与CRISPR-Cas9等基因编辑技术相结合，实现对特定基因的精准编辑。通过设计特定的RNA分子，引导Cas9酶识别并结合到目标基因上，从而实现基因的敲除、敲入或定点突变。 4. **疾病诊断**：RNA与cDNA杂交技术可用于检测病原体、肿瘤标志物等生物标志物，为疾病诊断提供依据。例如，在HIV感染检测中，可以通过检测病毒RNA的表达水平来判断患者是否感染。 ### 挑战 1. **杂交特异性**：RNA与cDNA杂交过程中，可能存在非特异性杂交，导致结果不准确。因此，设计特异性强的探针和优化杂交条件是提高杂交特异性的关键。 2. **背景干扰**：杂交过程中，背景信号可能会干扰真实信号的检测。为了降低背景干扰，需要优化杂交条件，如调整杂交温度、使用合适的杂交缓冲液等。 3. **RNA降解**：在样品处理过程中，RNA容易发生降解。为了减少RNA降解，需要采取有效的样品保存和提取方法。 4. **高通量分析**：随着高通量测序技术的发展，RNA与cDNA杂交技术逐渐向高通量方向迈进。然而，如何实现高通量、高灵敏度的杂交检测仍是一个挑战。 总之，RNA与cDNA杂交技术在分子生物学研究中具有广泛的应用前景。通过不断优化杂交技术，提高杂交特异性和灵敏度，有望在基因表达分析、基因克隆、基因编辑和疾病诊断等领域发挥更大的作用。

一笔签订于 5 年前的租房合同，让卓然股份（SH688121，股价 12.72 元，市值 29.72 亿元）全资子公司陷入房租纠纷，被对方索赔超 4300 万元。9 月 19 日盘后，卓然股份披露关于全资子公司江苏卓然企业服务有限公司（以下简称 " 江苏卓企 "）的涉诉公告，江苏卓企于近日收到靖江市人民法院送达的关于靖江港口集团有限公司（以下简称 " 靖港集团 "）起诉公司的相关材料。因江苏卓企与靖港集团发生房屋租赁合同纠纷，靖港集团以江苏卓企为被告向靖江市人民法院提起诉讼，要求后者支付厂房租金、违约金及占有使用费等暂合计 4324.48 万元。《每日经济新闻》记者注意到，靖港集团为靖江经济技术开发区管理委员会和靖江市人民政府国有资产监督管理办公室下属企业。子公司遭起诉被追讨租金及占用费逾 4300 万元2020 年 1 月 1 日，江苏卓企和靖港集团签订《厂房租赁合同》，约定租赁位于重装产业园的标准化厂房及附属设施。租期自 2020 年 1 月 1 日至 2024 年 12 月 31 日，租金为 3390.80 万元 / 年，每年平均分两次支付，即每年 6 月 30 日前支付一半，12 月 31 日前支付一半。据卓然股份 IPO（首次公开募股）资料，双方租赁的标的主要为面积约 14 万平方米的厂房。每经记者注意到，除上述不动产外，江苏卓企还在 2019 年至 2021 年期间从靖港集团处租赁过位于新天地港务码头 1。泊位靠泊能力为码头岸线长度 127 米，中建滚装泊位 5000 吨，水工 1 万吨。靖港集团认为，其已经按约交付租赁物，江苏卓企也实际使用，但后者至今仍欠付 2024 年度整年租金 2390.80 万元，并产生延期支付违约金。靖港集团还主张，租赁到期后，江苏卓企并未续租，但迟至 2025 年 7 月 18 日才迁出并与靖港集团办理交接手续。因此，靖港集团要求江苏卓企支付延期搬迁期间的占用使用费共计 1848.68 万元。江苏卓企至今未付，产生逾期付款利息。靖港集团在列举的事实与理由中援引双方约定：逾期交付租金，每逾期一日，按本合同总租金的千分之一加收违约金；延期搬迁期间的使用费，按合同实际租赁费用分摊到天数的 1.50 倍计算。基于上述理由，靖港集团请求判令江苏卓企支付上述各类款项合计 4324.48 万元。据靖港集团介绍，公司主营业务主要分为 5 大类：商品贸易、装卸仓储、动迁整理及代建、出租运营管理以及其他业务。据靖港集团披露的 2025 年债券中期报告，报告期内公司合计实现营收 21.02 亿元，同比减少约 18.24%。分业务来看，不考虑码头租赁收入，出租运营管理业务期内实现营收合计 0.57 亿元，营收占比约 2.72%。值得一提的是，靖港集团系地方国企，其股东为靖江经济技术开发区管理委员会和靖江市财政局。双方各执一词子公司反诉索还超额支付租金" 案件的诉讼金额仅为原告单方提起诉讼主张的请求金额，案件尚未开庭审理，涉案金额并非法院的判决结果，最终的判决结果尚未确定⋯⋯公司已经聘请专业的律师团队应诉，公司预计本次诉讼案件不会对公司日常生产经营产生重大影响。"在卓然股份看来，公司本次涉及诉讼主要系江苏卓企与靖港集团双方对厂房租赁租金结算问题不能达成一致意见所致。卓然股份在公告中表示，江苏卓企基于事实及所掌握的证据，已于 2025 年 8 月就同一事项向靖江市人民法院提交起诉靖港集团的相关材料，并诉请法院判令靖港集团返还江苏卓企超额支付的租金 1489.15 万元。不过，因靖港集团先于江苏卓企向同一法院提起诉讼，故法院退回江苏卓企诉讼材料，告知可在同案提起反诉。" 公司及全资子公司对靖港集团的主张不予认可，将依法积极应诉，并将于法定期限内提起反诉程序。" 卓然股份称。（声明：文章内容和数据仅供参考，不构成投资建议。投资者据此操作，风险自担。）