昨日相关部门披露新政策,RNA与cDNA杂交技术在分子生物学研究中的应用与挑战

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RNA与cDNA杂交技术是分子生物学研究中的一种重要技术手段，它利用RNA与互补的cDNA分子之间的碱基互补配对原理，实现基因表达水平的检测和基因序列的克隆。本文将详细介绍RNA与cDNA杂交技术的原理、应用以及面临的挑战。 ### 原理 RNA与cDNA杂交技术基于以下原理：在细胞中，mRNA通过转录过程从DNA模板上合成，然后经过翻译过程生成蛋白质。在这个过程中，cDNA（互补DNA）作为一种稳定的分子，可以代表mRNA在分子水平上进行分析。当RNA与cDNA分子进行杂交时，它们之间会发生碱基互补配对，形成稳定的双链结构。通过检测杂交双链的形成，可以间接反映mRNA的表达水平。 ### 应用 1. **基因表达分析**：RNA与cDNA杂交技术可以用于检测特定基因的表达水平，为研究基因调控机制提供重要依据。例如，通过比较正常细胞与肿瘤细胞中特定基因的mRNA表达水平，有助于发现与肿瘤发生相关的基因。 2. **基因克隆**：利用RNA与cDNA杂交技术，可以从复杂的基因表达谱中分离出目的基因。通过逆转录过程，将mRNA转化为cDNA，然后通过PCR扩增目的基因，从而实现基因克隆。 3. **基因编辑**：RNA与cDNA杂交技术可以与CRISPR-Cas9等基因编辑技术相结合，实现对特定基因的精准编辑。通过设计特定的RNA分子，引导Cas9酶识别并结合到目标基因上，从而实现基因的敲除、敲入或定点突变。 4. **疾病诊断**：RNA与cDNA杂交技术可用于检测病原体、肿瘤标志物等生物标志物，为疾病诊断提供依据。例如，在HIV感染检测中，可以通过检测病毒RNA的表达水平来判断患者是否感染。 ### 挑战 1. **杂交特异性**：RNA与cDNA杂交过程中，可能存在非特异性杂交，导致结果不准确。因此，设计特异性强的探针和优化杂交条件是提高杂交特异性的关键。 2. **背景干扰**：杂交过程中，背景信号可能会干扰真实信号的检测。为了降低背景干扰，需要优化杂交条件，如调整杂交温度、使用合适的杂交缓冲液等。 3. **RNA降解**：在样品处理过程中，RNA容易发生降解。为了减少RNA降解，需要采取有效的样品保存和提取方法。 4. **高通量分析**：随着高通量测序技术的发展，RNA与cDNA杂交技术逐渐向高通量方向迈进。然而，如何实现高通量、高灵敏度的杂交检测仍是一个挑战。 总之，RNA与cDNA杂交技术在分子生物学研究中具有广泛的应用前景。通过不断优化杂交技术，提高杂交特异性和灵敏度，有望在基因表达分析、基因克隆、基因编辑和疾病诊断等领域发挥更大的作用。

本文来自微信公众号：潜伏的木马君，作者：木马君，原文标题：《德国买房记  |  我披荆斩棘才搞到心仪的房子》，头图来自：AI 生成每年夏天，我们一家都会回到慕尼黑郊外小镇的家里过暑假。一下子从南京繁华的城市生活回到郊外小镇的安静生活，不仅气候和生活节奏有变化，居住环境也变化很大。在南京我们租住在高层建筑里的酒店式公寓里，而在慕尼黑，我们住在一个郊外有花园的自建房，俗称独栋。很多瓜友都很好奇，我们在德国的房子是什么样的？德国的房子贵不贵？在德国买房置业的过程是什么样的？从 2014 年搬去德国一直到现在，这期间我搬了三次家，作为一个中国人，不论在世界的哪个角落，安家置业一直是一种条件反射般的需求。我打算好好写一写我的《德国买房记》系列，和大家毫无保留地分享我在德国的住房迭代之路，以及我们购买现在的房子的过程。十一年前，我刚搬到慕尼黑时，公司安排了一个中介协助我处理国际调动中的各种琐事，其中最重要的就是帮我找房子。在慕尼黑，一房难求，作为一个不会德语的外国人，往往很难租到好房子。对于我这种国际调动来的外籍员工，一般合同是 2-3 年左右，所以我那时也不知道自己会在德国待多久。当年飞去慕尼黑时，我没有带任何大的物件，只随身带着几个行李箱。对于我这样的流动性高的外籍员工来说，租带全套家具的公寓最合适。我在慕尼黑租的第一个房子是个 40 平米的单室套，月租 950 欧（约 8000 人民币）。房子很老旧，洗衣机和厨房家电都有好几十年历史，浴室条件也很简陋。这个房子虽然条件不怎么样，房租偏高，但是它带全套家具包水电，离地铁站不远，很适合我这种初来乍到的外国人。这种带家具的单室套，一般来说面积小，租金高，适合商务人士短租，却并不适合长期居家生活。在德国的租房市场，大部分人喜欢租空空如也的房子，这样可以自己添置喜欢的家具，有些房子甚至连厨房的橱柜都没有，需要租客自己装修厨房。瓜友们可能觉得好奇，租别人的房子，还要重新买家具，那岂不是麻烦？其实这是因为德国人租房子大多是奔着长远去的，有些家庭会长年累月地租房住。如果把租来的房子打造成自己的家的话，那想要用自己喜欢的家具，也就很好理解了。以后搬家了也可以带着自己的家具甚至是厨房一起搬。像我这种需要拎包入住的租客，在德国反而成了小众需求。2014 年刚到德国时，我租住的第一套房子人的认知和眼光是会不断变化的，用我现在的眼光来看，这个单室套条件真不怎么样，但是十几年前我还不了解德国的居住环境，那时我觉得这个公寓已经很棒了，虽然小但是干净整洁温暖。后来我认识了木马爸爸，他在慕尼黑也算是个外乡人，租住在一个 38 平米的条件非常简朴的单室套里，月租 850 欧（约 7000 人民币）。不得不再次感叹，慕尼黑的房租是真贵啊！一我和木马爸爸正式开始交往后，便常常互相串门，有时他来我的公寓，有时我去他的公寓。慢慢地，我们便开始打算起来，既然两个人都在支付价格昂贵却空间狭小的单室套，那不如把两份租金合在一起，租一套更大更好的公寓。于是，我开始物色合适的公寓（虽然我德语不通），从那时起，我们家的分工就很明确，所有关于房产和财务的事，在我们家都是我的课题。万万没想到，一头扎入德国主流租房市场，我才发现在慕尼黑租房如此之难。早在十几年前，我还在西班牙工作时，就已经从德国同事那里听闻了德国找房子难。一次，和一个要调回慕尼黑的女同事一起吃饭，她说她两周后有个面试。我以为她说的是工作上的面试，心想，她的新工作岗位不是早就确定了吗？她跟我解释道，不是工作面试，是未来房东要面试。原来，她正在慕尼黑找房子，看中的房子，有一个公开参观时间。一般来说，在德国租房，如果你想看房，有意向的租房者需要联系中介或是房东，事先提交自己的资料，然后你可以在房东安排好的公开参观时间去看房。女同事跟我说，遇到特别抢手的好房子，同一时间有十多个人一起看房也是常有的。你想象一下那个场景，一套房子，十来个人一起看房，这种压力就像毕业季找工作时，遇到 500 强组织的群面。好工作自然抢手，公司偏要叫你们聚在一起，精神上互相 " 群殴 "，争取同一个机会。准确说来，你得到房子的几率有可能比通过 500 强群面的几率还要低，毕竟房子只有一套，而公司可以一次招很多人。当时听了德国女同事的描述，我只觉得不可思议。没想到，很快我就自己体验了一把。二你想找一个面积适中，采光好，上班近，租金合理，房屋比较新的房子，在慕尼黑这可能比单身狗脱单还难。毕竟大家找男人的眼光各有不同，不一定要竞争，但是找房子的眼光却是相似的，你看上的房子，别人也看上了。我看上了一个 80 多平米的两室一厅公寓，地段很好，附近就有地铁站，且离我和木马爸爸的公司都不远。房子很新，是全新装修后的第一次入住。新装修的房子，第一次寻找租客，这属于稀缺资源，相当于在大龄相亲市场上偶遇金城武。联系了房东，提交了各种资料后，我很幸运地获得了看房的机会。刚好那段时间木马爸爸去国外出差了，但好房不等人，于是我决定凭一己之力搞定这件事。到了看房时间，居然只有我一个人，我心里窃喜，看来竞争不太激烈嘛。后来，我才发现，这位房东没有采用集体看房，而是采用了车轮战。这一天里，平均每 20-30 分钟接待一组看房人，一个个轮流看房，实际上也相当于面试。房东说，今天一共会有七八个人来看房。我：......我去赴约看房前，特地和好友小马商量，我该准备些什么。小马是奥地利人，也在慕尼黑租房住。我俩分析了一下，按照德国房东的喜好来说，我是外国人，不会说德语，且没有成家养娃（因为不够稳定），这些都是扣分项。特别是有些房东会担心中国人的烹饪习惯，一个大火爆炒会让厨房乌烟瘴气（德国的抽油烟机基本是摆设）。但好在我在大公司工作，受过高等教育，且收入稳定，这算是加分项。看房那天，我特地穿上了挺职业的套装，花了淡妆，努力把自己捯饬成一个商务人士的样子。我带上了个人简历，德国工作合同，过去三个月的薪资单，护照及签证，并在心里默默地彩排了好几遍，我要怎么陈述自己租房的诚意以及我的优势。感觉我这不是去看房子，而是去联合国面试。三我看了这套房子，果然很满意。房东看了我，果然是不满意。因为我们根本无法交流，他不大会说英语，而我的德语也不大灵光。我们指手画脚地沟通了半天，我只好把准备好的一大摞资料都逐一翻给他看。他看了我的资料，大约也感受到我的诚意，面色稍有和缓，表示会认真考虑。我还没结束看房，门铃就响了，下一组看房人已经等在门外了。我一看，下一组看房人是一对穿得很体面的德国青年人，心里顿时凉了半截。回去等了两天，果然杳无音讯。想来，房东没有选择我吧。我决定再争取一下，又请小马代为翻译，用德语写了一封邮件，跟房东表达我想租房的诚意。我在信里写道：您的房子的装修设计非常高级，这种简约明快的风格，克制的墙壁颜色搭配原木色地板，正是我非常喜欢的。（其实我之前在租房广告上看到，房东本人就是这整栋房子的设计师，所以忍不住拍了一通马屁）天啊，为了租房，我居然竭尽全力使出了溜须拍马的技能，平时即使集团 CEO 站在我面前，我都不会这样谄媚。唉 ......追加了这封邮件后，我决定尽人事，听天命。又过了两天，奇迹发生了，房东通知我，最后决定把房子租给我！我分析了一下，平时挑选租房者，应该不需要考虑五六天时间，我肯定原本不是他的第一选择。但是第一选择的租房者，可能因为各种原因，最后没有租下，所以我就成了备选项，再加上我的努力争取和诚意，大约也打动了房东。无论如何，我终于顺利地在慕尼黑租下了心仪的房子，这个过程虽然不容易，但也挺有成就感。现在回头看看，忍不住要夸自己一句，不管是租房，找工作，还是做其他任何事，我这个人的优点是，会努力做好准备工作，比如看房时我带了非常齐全的各种资料，即使语言不通，房东也能感受到我的诚意。还有就是，尽最大努力去为自己争取，比如我追加给房东的邮件，可能就起到了扭转局面的作用。四这套公寓的主人就是建筑设计师，因此内部装修确实很有格调。公寓是两室一厅，不带家具，但厨卫配置齐全，房租 1250 欧，水电暖气另算。我和木马爸爸去宜家买了一些实用家具，给公寓装上了窗帘，买了电视和装饰品，于是，算是有了我们在德国的第一个家。在这个公寓里我们住了好几年，这期间木马爸爸和我订婚，结婚，有了小木马，一直到小木马出生前两个月，我们才退租，搬去了自己盖的房子。