本月行业协会披露重要信息,RNA与cDNA杂交技术在分子生物学研究中的应用与挑战

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RNA与cDNA杂交技术是分子生物学研究中的一种重要技术手段，它利用RNA与互补的cDNA分子之间的碱基互补配对原理，实现基因表达水平的检测和基因序列的克隆。本文将详细介绍RNA与cDNA杂交技术的原理、应用以及面临的挑战。 ### 原理 RNA与cDNA杂交技术基于以下原理：在细胞中，mRNA通过转录过程从DNA模板上合成，然后经过翻译过程生成蛋白质。在这个过程中，cDNA（互补DNA）作为一种稳定的分子，可以代表mRNA在分子水平上进行分析。当RNA与cDNA分子进行杂交时，它们之间会发生碱基互补配对，形成稳定的双链结构。通过检测杂交双链的形成，可以间接反映mRNA的表达水平。 ### 应用 1. **基因表达分析**：RNA与cDNA杂交技术可以用于检测特定基因的表达水平，为研究基因调控机制提供重要依据。例如，通过比较正常细胞与肿瘤细胞中特定基因的mRNA表达水平，有助于发现与肿瘤发生相关的基因。 2. **基因克隆**：利用RNA与cDNA杂交技术，可以从复杂的基因表达谱中分离出目的基因。通过逆转录过程，将mRNA转化为cDNA，然后通过PCR扩增目的基因，从而实现基因克隆。 3. **基因编辑**：RNA与cDNA杂交技术可以与CRISPR-Cas9等基因编辑技术相结合，实现对特定基因的精准编辑。通过设计特定的RNA分子，引导Cas9酶识别并结合到目标基因上，从而实现基因的敲除、敲入或定点突变。 4. **疾病诊断**：RNA与cDNA杂交技术可用于检测病原体、肿瘤标志物等生物标志物，为疾病诊断提供依据。例如，在HIV感染检测中，可以通过检测病毒RNA的表达水平来判断患者是否感染。 ### 挑战 1. **杂交特异性**：RNA与cDNA杂交过程中，可能存在非特异性杂交，导致结果不准确。因此，设计特异性强的探针和优化杂交条件是提高杂交特异性的关键。 2. **背景干扰**：杂交过程中，背景信号可能会干扰真实信号的检测。为了降低背景干扰，需要优化杂交条件，如调整杂交温度、使用合适的杂交缓冲液等。 3. **RNA降解**：在样品处理过程中，RNA容易发生降解。为了减少RNA降解，需要采取有效的样品保存和提取方法。 4. **高通量分析**：随着高通量测序技术的发展，RNA与cDNA杂交技术逐渐向高通量方向迈进。然而，如何实现高通量、高灵敏度的杂交检测仍是一个挑战。 总之，RNA与cDNA杂交技术在分子生物学研究中具有广泛的应用前景。通过不断优化杂交技术，提高杂交特异性和灵敏度，有望在基因表达分析、基因克隆、基因编辑和疾病诊断等领域发挥更大的作用。

近日，市民李女士反映，自己在上海某知名三甲医院就诊后，发现其看诊视频，未经同意就被发布在，该医生的社交平台账号上，虽然面部有被打码，但身形、声音和病史等细节，让熟悉她的朋友一眼便认出，在不知情的情况下被拍摄就诊过程，网上公开发布后朋友来问，回想自己的就诊经历。李女士表示，当天就已经感觉到不适。6 月 13 日，李女士按照预约时间，前往上海某三甲医院神经外科就诊，进入诊室后，就看到除医生之外，还有四五个身着医护装的年轻人在诊室里。只见上述几名年轻人时而交头接耳，时而低头记录，但始终无人告知李女士他们的身份以及在场的原因。" 坐在诊椅上，感觉像是被围观。" 整个问诊过程，这些人一直没有离开过诊室。因急于问诊，李女士只得按捺住不适，全神贯注于与医生交流。她表示，在就诊过程中并未察觉有拍摄设备正记录其看诊情况，也无人告知会被用作 " 诊疗素材 "，更没有意识到一次普通就诊会在一个月后给自己带来巨大困扰。7 月中旬，李女士收到朋友转来的一条视频，" 问视频里的人是不是我 "，点开视频的瞬间，她就一阵头皮发麻，视频内容正是自己此前就诊的经历。尽管在公开发布的视频中，对自己面部做过小范围马赛克处理，但衣着和手提包、清晰可辨的话语声，以及医生分析病情过程中提及的关键病史信息，都让朋友 " 一眼认出 "，也让其陷入尴尬与不安。医生账号公开发布的视频（受访者供图）该医生视频账号的 " 门诊实录 " 合集，发布了 78 个患者看诊案例" 太生气了，我感觉自己的隐私被彻底侵犯了。"说起看见视频的瞬间，李女士语气还是很激动。" 当时整个人都懵了。从进入诊室到离开，没有任何人提示我有可能被拍摄，更不用说征求我的明确同意了。" 李女士强调，" 看病是极其私密的事，谁愿意未经同意就把它公之于众？"李女士的经历被报道后，不少网友感同身受：真的很过分。患者隐私保护应该如何认定？仅面部打码是否算尽到隐私保护义务？事实上，李女士的经历并非个案。在自媒体日益普遍的时代，这一幕已在众多患者身上上演。记者调查发现，全国不少三甲医院的医生均在各大平台开设 " 科普账号 "，且普遍采用 " 专业解读 + 病例分享 " 的模式，通过真实诊疗场景增强科普内容的吸引力和可信度。其中，部分账号通常拥有可观的粉丝数，所发布的案例视频常获得数千点赞和评论，但在患者隐私保护方面却存在明显漏洞和隐患。许多有此经历的患者在社交媒体上发帖表达不满社交平台上，为数不少的网友留言反映相同遭遇，作为公开发布视频里的主要人物，患者知情同意权没有被充分尊重：有人拔牙期间被拍摄，医生告知会被用作 " 案例 "；有人就诊期间看到相机，可拍摄人员未明确告知用途；有人完全不知道被拍摄，视频就直接被发布在社交平台上，直到患者发现或投诉后才下架为规范医疗科普内容创作，保护患者的权益，2025 年 3 月 20 日，上海推出了全国首个 " 互联网健康科普负面行为清单 "，其中明确指出" 禁止发布违背伦理道德、公序良俗、侵犯他人隐私的内容 "。而在具体实施过程中，究竟要怎样界定 " 侵犯他人隐私 " 的标准，各方的意见不一。许多医疗自媒体创作者认为，只需对患者面部进行打码处理即尽到隐私保护义务。但对于部分患者而言，这一做法存在明显局限：一方面，只对面部进行处理，无法有效隐匿患者其他身份特征，如衣着、音色、病史信息等；另一方面，诊疗过程中，透露出工作类别、生活习惯、居住区域等信息，或均成为识别患者身份的关键线索。且一旦此类看诊视频发布，其传播范围难以控制，可能被下载、转发，甚至被二次剪辑传播，进一步扩大隐私泄露风险。而现有下架机制通常滞后于传播速度，如若发生隐私泄露，损害难以挽回。自发现视频的次日，李女士便开启维权之路。经多次沟通，目前相关视频已被删除，但李女士坚持要求医生道歉的诉求，截至发稿，仍未得到回应。其间，李女士曾咨询专业律师。律师明确表示，医生未经明确同意拍摄并发布就诊过程，确实涉嫌侵犯患者的肖像权、隐私权和个人信息权，从法律层面构成侵权。同时，律师也提醒李女士，这一类侵权案件维权面临现实困境。患者要投入大量时间、精力和经济成本，收集证据、进行公证、提起诉讼，且即便胜诉，赔偿金额一般都弥补不了患者所遭受的精神损害。寻求医学科普与平衡隐私保护，医学科普有重要社会价值，可提升公众健康素养，帮助患者正确认识疾病，缓解医患信息不对称。如今，医疗自媒体快速发展，如何平衡科普公益性与患者隐私保护，成为亟待解决的重要课题。市民普遍呼吁，医疗机构应建立完善患者同意流程，确保患者在充分了解视频用途、传播范围和潜在风险的基础上，通过书面同意形式做出真实意愿表达；同时，明确患者可以随时撤回意见并且不影响后续就医。与此同时，技术创新为隐私保护提供更多可能性，除基本面部打码，还可采用变声、背景替换、体型模糊等处理技术，最大限度保护患者隐私。此外，医疗自媒体监管需建立多方共治机制：平台方应完善审核机制，重点审核医疗科普内容；行业协会制定更细致行业准则；监管部门加强执法力度；在隐私保护判断标准上，充分尊重患者主观感受，建立便捷反映渠道，及时回应患者关切。" 希望我的经历能推动医疗自媒体行业规范发展。" 李女士表示，" 科普很重要，但不能以牺牲普通人隐私为代价。"你在就诊时遇到过类似情况吗？你怎么看？欢迎来评论区讨论。